血培養(yǎng)標(biāo)本由護(hù)士或醫(yī)師采集，建議有條件的醫(yī)院組建專(zhuān)職采血小組。應(yīng)制定標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程和步驟清單，并對(duì)采集人員進(jìn)行培訓(xùn)。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)定期或不定期對(duì)血培養(yǎng)送檢合格率進(jìn)行評(píng)價(jià)、并及時(shí)反饋。

血培養(yǎng)送檢合格率評(píng)價(jià)包括：標(biāo)本標(biāo)識(shí)，送檢血培養(yǎng)瓶的種類(lèi)、數(shù)量、有無(wú)破損、采血量、送檢時(shí)間及污染率等。控制污染率≤3%。一旦污染率超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)及時(shí)從手衛(wèi)生、采血過(guò)程等多方面綜合查找原因，并及時(shí)與臨床醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行溝通、必要時(shí)進(jìn)行再培訓(xùn)。一旦懷疑患者為血流感染，應(yīng)在抗微生物藥物使用之前立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本；對(duì)已使用抗微生物藥物的患者，建議在下一次應(yīng)用抗微生物藥物之前采集標(biāo)本。

對(duì)于懷疑感染性心內(nèi)膜炎患者，建議立即在10min內(nèi)采集2-3套血培養(yǎng)（每套血培養(yǎng)包括一個(gè)需氧瓶和一個(gè)厭氧瓶)，每套采血量16~20ml，如果培養(yǎng)24h未報(bào)陽(yáng)，再采集1-2套血培養(yǎng)。對(duì)于兒童應(yīng)根據(jù)體重調(diào)整采血量，見(jiàn)兒童血培養(yǎng)共識(shí)。對(duì)于中性粒細(xì)胞減少癥患者，采血總量不應(yīng)超過(guò)患者全血量的1%（人體血液量約70ml/g)。在任何情況下，對(duì)成人患者只采1瓶血培養(yǎng)是不能接受的。

采血量是影響血培養(yǎng)陽(yáng)性率最重要的因素，保證足夠血量可以采用雙側(cè)穿刺、每側(cè)2瓶（需氧瓶+厭氧瓶)。之前研究表明，單點(diǎn)一次抽血采集足夠血液總量同時(shí)接種所要求的血培養(yǎng)瓶，與多點(diǎn)采血的性能和靈敏度相當(dāng)，但沒(méi)有被后續(xù)共識(shí)或指南采納。對(duì)感染性心內(nèi)膜炎推薦在24h內(nèi)至少進(jìn)行3次穿刺采樣。一般每瓶8~10ml血液，禁止過(guò)少或過(guò)多，當(dāng)每瓶血液少于5ml時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)假陰性或微生物生長(zhǎng)延遲。當(dāng)每瓶超過(guò)10ml時(shí)，可能會(huì)因?yàn)榘准?xì)胞產(chǎn)生了大量的本底CO2，而造成培養(yǎng)假陽(yáng)性。

血培養(yǎng)陽(yáng)性后需要隨訪，看是否轉(zhuǎn)陰，特別是在以下情況，須再次采集血培養(yǎng)。包括：

(1)感染性心內(nèi)膜炎；

(2)骨髓炎；

(3)金黃色葡萄球菌菌血癥：

(4)念珠菌菌血癥等，

建議選擇外周靜脈進(jìn)行穿刺采血，除非需要診斷CRBSI,否則不建議從留置的靜脈或動(dòng)脈導(dǎo)管采集血標(biāo)本。切忌在靜脈輸液側(cè)肢體采集血培養(yǎng)。如果患者輸液無(wú)法停止，應(yīng)在對(duì)側(cè)肢體采集血培養(yǎng)標(biāo)本。臍帶血血培養(yǎng)血量為1ml，直接注入需氧血培養(yǎng)瓶或兒童瓶，不常規(guī)進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。極特殊情況可以選擇動(dòng)脈穿刺采血，動(dòng)脈血在污染率和檢測(cè)敏感性力面與靜脈血相似。通過(guò)預(yù)先留置的導(dǎo)管取樣會(huì)增加污染風(fēng)險(xiǎn)，但從新置入的靜脈導(dǎo)管(1h內(nèi))采集，其污染率與外周靜脈并無(wú)差異。

對(duì)預(yù)置導(dǎo)管患者，如果疑似CRBSI，在準(zhǔn)備拔除導(dǎo)管的情況下建議在拔出導(dǎo)管的同時(shí)，送檢2套外周靜脈血培養(yǎng)和導(dǎo)管尖端5cm進(jìn)行半定量培養(yǎng)。在不拔出導(dǎo)管的情況下建議至少同時(shí)采集2套血培養(yǎng)，一套從外周靜脈，另一套從導(dǎo)管采血；對(duì)于多腔靜脈導(dǎo)管，樣本應(yīng)取自所有管腔（每個(gè)管腔取相同體積)，分別進(jìn)行血培養(yǎng)。單獨(dú)送檢經(jīng)導(dǎo)管抽取的血液或單獨(dú)送檢導(dǎo)管而不配套采集經(jīng)皮穿刺血培養(yǎng)不能判斷CRBSI。

建議采集者在采集前進(jìn)行手衛(wèi)生消毒，并且佩戴適當(dāng)大小的一次性手套或無(wú)菌手套。去除血培養(yǎng)瓶上的塑料帽，用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶頂部塑膠塞，自然干燥60s；再對(duì)擬采血部位進(jìn)行皮膚消毒，可根據(jù)患者的年齡、過(guò)敏史等選用碘伏、≥2gL氯己定-乙醇(70%)溶液、70%~80%乙醇溶液、70%異丙醇等消毒劑。消毒擦拭方法、時(shí)間和等待干燥的時(shí)間嚴(yán)格遵循產(chǎn)品的使用說(shuō)明，建議成人皮膚消毒面積直徑為6~7cm。皮膚消毒后血管穿刺前不能再次觸診靜脈（如有必要，應(yīng)戴無(wú)菌手套）。

建議使用注射器或蝶形針采血，按照瓶上的刻度線采集到推薦的血量。使用注射器采集血液后勿換針頭，直接注入血培養(yǎng)瓶、如果采血量充足、先注入?yún)捬跗?，再注人需氧瓶；如果抽血量少于推薦的血量，應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶的血量達(dá)到8ml，剩余的血液接種到厭氧瓶。使用蝶形針采血，采集過(guò)程中應(yīng)保持培養(yǎng)瓶直立放置，位置低于患者手臂、先注入需氧瓶，再注人厭氧瓶。血液注入血培養(yǎng)瓶后，立即輕輕上下傾倒幾次混勻，以防血液凝固，穿刺采集第2套血培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)應(yīng)更換注射器針頭或蝶形針。

建議根據(jù)臨床初步診斷選擇需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶、真菌培養(yǎng)瓶和分枝桿菌培養(yǎng)瓶。大多數(shù)念珠菌可以在需氧瓶中生長(zhǎng)，一些念珠菌（如光滑念珠菌)在厭氧瓶生長(zhǎng)更快?？紤]除酵母菌以外的其他真菌引起的血流感染時(shí)，需增加一個(gè)真菌培養(yǎng)瓶。對(duì)于已經(jīng)接受抗微生物藥物治療的患者，建議使用含抗微生物藥物吸附劑或中和劑的培養(yǎng)瓶。有添加劑的培養(yǎng)瓶可以培養(yǎng)出更多微生物，特別是葡萄球菌和酵母菌。

在血培養(yǎng)標(biāo)本采集完成后，建議立即貼上標(biāo)簽、標(biāo)簽的位置勿遮蓋培養(yǎng)瓶條碼及血量檢測(cè)區(qū)、并注明采集時(shí)間（精確到分鐘）。

建議將血培養(yǎng)瓶放入專(zhuān)門(mén)的標(biāo)本運(yùn)送容器內(nèi)，防止其掉落和互相碰撞。如果通過(guò)氣動(dòng)管道系統(tǒng)運(yùn)送，事先應(yīng)評(píng)估血培養(yǎng)瓶放置是否足夠牢固。建議血培養(yǎng)標(biāo)本在采集后2h內(nèi)（最遲不超過(guò)4h）送至實(shí)驗(yàn)室，室溫(20~25C)運(yùn)送，運(yùn)送條件須符合生物安全要求。如果運(yùn)送延遲，應(yīng)置于室溫(20-25℃)保存，切勿冷藏或冷凍。

對(duì)于所有超過(guò)2h接收的血培養(yǎng)瓶，須注意觀察其生長(zhǎng)指標(biāo)，例如傳感器的顏色、溶血、氣體、渾濁度等，如果涂片染色發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌生長(zhǎng)，應(yīng)與陽(yáng)性瓶一樣對(duì)待。

不能提供24h樣本接收服務(wù)的實(shí)驗(yàn)室，可以在臨床科室（如急診、重癥監(jiān)護(hù)室)設(shè)立小型的血培養(yǎng)系統(tǒng)，即“衛(wèi)星血培養(yǎng)”，但應(yīng)遵循一定的生物安全管理要求。文獻(xiàn)表明，衛(wèi)星血培養(yǎng)從樣本收集到陽(yáng)性報(bào)警平均縮短10.1h，臨床首次藥物處方調(diào)整時(shí)間也由原來(lái)的64h縮短為42.8h。